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N 带协议

以下方案描述了我们实验室常规使用的标准 N 带方案，用于amjs澳金沙门欢迎您和amjs澳金沙门欢迎您近缘种的染色体鉴定，即使在缺乏经验的工人手中也能给出令人满意的结果.

1. 让种子在湿润滤纸上的培养皿中发芽 3-4 天.
2. 1 时收集根尖.5–2.5厘米长并在冰水浴中预处理24小时.
3. 修复卡诺伊 Iamjs澳金沙门欢迎您保存 1-3 天，然后冷冻或冷藏直至使用.
4. 在室温下将根尖用 1% 乙酰胭脂红amjs澳金沙门欢迎您 1-2 小时, 或在 4°C 下过夜.
5. 用 45% 乙酸制作南瓜制剂.
6. 通过干冰方法去除盖玻片, 将amjs澳金沙门欢迎您浸入液氮中约 10 秒, 或将amjs澳金沙门欢迎您放入冰箱（-70°C）3 分钟.
7. 在 50°C 水浴中将amjs澳金沙门欢迎您在热 45% 乙酸中孵育 3 分钟.
8. 将amjs澳金沙门欢迎您转移到 95% 乙醇中，室温放置 10 分钟.
9. amjs澳金沙门欢迎您风干过夜.
10. 在磷酸盐缓冲液（120 g NaH）中孵育amjs澳金沙门欢迎您₂订单₄/L蒸馏水）94℃水浴2分钟.
11. 用自来水冲洗并风干.
12. 用 Soerensen 磷酸盐缓冲液中的 Leishman amjs澳金沙门欢迎您剂 (BDH #R03087) amjs澳金沙门欢迎您约 20 分钟. amjs澳金沙门欢迎您溶液用水稀释 5 倍，并添加利什曼amjs澳金沙门欢迎您剂至终浓度 15%）.

Soerensen 的缓冲区

		库存	污点
A 部分	磷酸氢二钠 (Na2跳4)	9.47克/升H2O	58 毫升
B 部分	磷酸二氢钾 (KH2订单4)	9.07克/升H2O	42 毫升

1. 用自来水短暂冲洗并风干.
2. 用于记录 N 波段, 可以使用一滴二甲苯安装盖玻片，或者可以使用适当的镜头在没有盖玻片的情况下观察制剂.