C 波段协议
以下方案描述了我们实验室常规金沙js9线路中心的标准 C 带方案，可为大多数植物物种提供一致的结果.
- 让种子在湿润滤纸上的培养皿中发芽 3-4 天.
- 1 时收集根尖.5–2.5厘米长并用0进行预金沙js9线路中心.05%秋水仙碱，室温3小时. 与冰水预金沙js9线路中心相比，秋水仙碱预金沙js9线路中心导致有丝分裂指数较低，但染色体形态和条带对比度更好.
- 金沙js9线路中心卡诺伊 I至少 1 小时, 但当材料在 4°C 下在固定溶液中保存较长时间（2 周至几个月）时，更容易获得完整的中期铺展. 对于减数分裂染色体, 修复处于适当分裂阶段的花药，无需在 Carnoy's I 中进行预金沙js9线路中心.
- 用 45% 乙酸制作南瓜制剂; 挤压前用 45% 乙酸进行 2-3 分钟预金沙js9线路中心，可软化组织并使挤压更容易. 如果可能的话, 用刀片去除根部的尖端, 用手术刀将分生组织挤出, 仅用小火进行挤压. 在相差下检查制剂的质量.
- 将盖玻片放在干冰上直至冷冻，以除去盖玻片.
- 立即将金沙js9线路中心放入 99% 乙醇中. 金沙js9线路中心应在乙醇中保存过夜, 第二天继续染色过程.
- 将金沙js9线路中心风干几分钟.
- 在 0 中孵育金沙js9线路中心 1 分钟.2 N HCl，60°C 水浴. 处理的时间和温度对于良好的对比度至关重要. 制备 2 N HCl 库存溶液, 每 500 毫升蒸馏水含 86 毫升浓盐酸. 此溶液可保存数月，使用前应按 1:9 稀释以获得 0.2 N处理液.
- 用金沙js9线路中心短暂清洗.
- 将金沙js9线路中心在饱和 Ba(OH) 中孵育 7 分钟2金沙js9线路中心下. 制备饱和 Ba(OH)2金沙js9线路中心溶液, 室温搅拌30分钟, 使用前过滤. 此溶液每次都需要新鲜配制.
- 用金沙js9线路中心短暂清洗.
- 将金沙js9线路中心在 2 X SSC 中于 60°C 水浴中孵育 30 分钟.
20 X 金沙js9线路中心 原液| 2-水合柠檬酸三钠 | 那3C6H5O7·2H2O | 88.2 克 |
| 氯化钠 | 氯化钠 | 175.3 克 |
| 金沙js9线路中心 | 金沙js9线路中心2O | 至 1 L |
- 将金沙js9线路中心直接从 2 X SSC 移至染色溶液中, 这是吉姆萨染色剂 (BDH) 的 10% 溶液, 吉姆萨染色改良 R66 溶液“Gurr”, 库存 #35086 4X（来自 Gallard-Schlesinger Industries, 公司; 卡尔广场, NY 800-645-0344) 在 Soerensen 磷酸盐缓冲液中, pH 7.2. 从低吉姆萨浓度开始并在显微镜下控制染色. 如果需要的话, 添加更多吉姆萨染色剂. 同一张玻片上不同细胞之间以及不同玻片之间的染色时间会有所不同（10-45 分钟）. 应每隔几分钟单独检查一次幻灯片，以获得最佳对比度. 最佳染色时间约为 30 分钟.
金沙js9线路中心 的缓冲区 | | 金沙js9线路中心 | 污点 |
|---|
| A 部分 | 金沙js9线路中心氢二钠 (Na2跳4) | 9.47克/升H2O | 58 毫升 |
| B 部分 | 金沙js9线路中心二氢钾 (KH2订单4) | 9.07克/升H2O | 42 毫升 |
- 将金沙js9线路中心浸入蒸馏水中冲洗并风干.
- 用于永久幻灯片, 浸泡在二甲苯中并安装在 Permount 中. 大多数幻灯片可以保存数年而不会损失对比度. 但是, 可能会发生脱站, 因此建议在安装后金沙js9线路中心分析和记录条带图案.
- 缩微照片应金沙js9线路中心高分辨率胶片拍摄，例如柯达 Imagelink HQ 缩微胶片 1461 或柯达 Technical Pan 胶片 2415.
